主要用途
医疗方面
①用于治疗和预防维生素B12缺乏症。
②用于胃切除或吸收不良综合症，维生素B12缺乏造成贫血的预防。
③用于补充因消耗性疾病，甲状腺机能亢进，哺乳等造成的维生素B12需求增加。
④营养性贫血。
⑤广节裂头绦虫病贫血。
⑥肝障碍贫血。
⑦放射性引起的白细胞减少。
⑧神经疼，肌肉疼，关节疼。
⑨末梢神经炎，末梢神经麻痹。
⑩脊髓炎，脊髓变性。
饲料添加剂
维生素B12对于机体生长是一种不可缺少的微量营养物质，大多数动物的植物性饲料中不含维生素B12，动物一方面靠胃肠中的微生物合成，一方面靠外界添加。为了满足动物维生素的需要就必须补充维生素添加剂。
猪和鸡等非反刍动物缺乏维生素B12主要表现是生长发育停滞，也有少数猪可出现轻度的正常红细胞性贫血。此外，还可使鸡的孵化率降低。缺乏症的临床症状包括食欲不振、生长停滞、单纯贫血，严重的也有神经症状。
饲料维生素B12能促进家禽，特别是幼禽幼畜的生长发育。
可用于：
①维生素B12缺乏所引起的猪、鸡生长发育不良和贫血；
②缺钴地区牛、羊所出现的地方性消瘦病；
③神经炎、神经痛等的非特异性治疗；
④提高饲料蛋白的利用率；
⑤经济动物的饲养；
⑥用B12溶液处理鱼卵或鱼苗，可提高鱼对水中有毒物质如苯和重金属的耐受力。
其它
①食品添加剂
②可作为食品着色剂：如火腿，香肠，冰淇淋，鱼肉酱。
③用于化妆品，肥皂，牙膏等，也可用于厕所，冰箱，口腔等防臭，消除硫化物和醛的气味。
空气污染物去毒
英国曼彻斯特大学的科学家们一项长达15年的研究取得重大突破成果，他们希望这一结果将促进研发对危险空气污染物，例如多氯联苯（PCBs）和二氧（杂）芑进行去毒的有效方法。这项发表在期刊《自然》上的研究细节描述了某些生物体是如何降低污染物的毒素。
曼彻斯特大学生物技术研究所的研究小组调查了某些自然生物体是如何降低毒素水平并缩短严重污染物的寿命。
大卫·里斯教授解释称：“我们已经知道某些-毒的污染物包含卤原子，而大多数生物系统并不知道如何处理这些分子。然而，某些生物体可以利用维生素B12移除这些卤原子。我们的研究已经能够确定它们利用维生素的方式与我们所知的大不相同。”